1. اختيار خط الخلية الصحيح
عند اختيار خط الخلية المناسب لتجربتك ، يرجى مراعاة المعايير التالية:
أ- الأنواع: عادةً ما يكون لخطوط الخلايا غير البشرية وغير الرئيسية قيود أقل على السلامة الأحيائية ، ولكن في النهاية ستحدد تجربتك ما إذا كنت تريد استخدام ثقافة نوع معين.
ب- الميزات: ما هو الغرض من تجربتك؟على سبيل المثال ، قد تكون خطوط الخلايا المشتقة من الكبد والكلى أكثر ملاءمة لاختبار السمية.
ج- محدود أو مستمر: على الرغم من أن الاختيار من خط خلية محدود قد يوفر لك المزيد من الخيارات للتعبير عن الوظيفة الصحيحة ، إلا أنه من الأسهل عمومًا استنساخ خطوط الخلايا المستمرة والحفاظ عليها.
د- طبيعي أو متحول: عادةً ما يكون لخطوط الخلايا المحولة معدل نمو أعلى وكفاءة بذر أعلى ، وهي مستمرة وتتطلب مصلًا أقل في وسط الاستزراع ، لكن نمطها الظاهري قد خضع لتغييرات دائمة من خلال التحول الجيني.
هـ- شروط النمو وخصائصه: ما هي متطلباتك لسرعة النمو وكثافة التشبع وكفاءة الاستنساخ وقدرة نمو التعليق؟على سبيل المثال ، للتعبير عن البروتينات المؤتلفة في عوائد عالية ، قد تحتاج إلى تحديد خطوط الخلايا التي تتمتع بمعدلات نمو سريعة والقدرة على النمو في حالة التعليق.
و.معايير أخرى: إذا كنت تستخدم خطًا خلويًا محدودًا ، فهل هناك مخزون كافٍ متاح؟هل الخط الخلوي مميز بالكامل ، أم يجب عليك التحقق منه بنفسك؟إذا كنت تستخدم خط خلية غير طبيعي ، فهل هناك خط خلية عادي مكافئ يمكن استخدامه كعنصر تحكم؟هل خط الخلية مستقر؟إذا لم يكن الأمر كذلك ، فما مدى سهولة استنساخه وتوليد مخزون مجمد كافٍ لتجربتك؟
2. الحصول على خطوط الخلايا
يمكنك بناء ثقافتك الخاصة من الخلايا الأولية ، أو يمكنك اختيار شراء مزارع الخلايا الراسخة من الموردين التجاريين أو غير الربحيين (مثل البنوك الخلوية).يوفر الموردون ذوو السمعة الطيبة خطوط خلايا عالية الجودة تم اختبارها بعناية للتأكد من سلامتها والتأكد من خلو المزرعة من الملوثات.نوصي بعدم استعارة الثقافات من المختبرات الأخرى لأن لديهم مخاطر عالية لتلوث زراعة الخلايا.بغض النظر عن مصدرها ، يرجى التأكد من اختبار جميع خطوط الخلايا الجديدة لتلوث المايكوبلازما قبل البدء في استخدامها.
الوقت ما بعد: فبراير 01-2023